前    言

本标准的附录A和附录B为资料性附录。

本标准由中华人民共和国司法部司法鉴定科学技术研究所提出。

本标准由中华人民共和国司法部归口。

本标准起草单位：中华人民共和国司法部司法鉴定科学技术研究所。

本标准主要起草人：卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。

SF/Z JD0107001-2010

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血液中乙醇的测定

顶空气相色谱法

1 范围

本标准规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。

本标准适用于血液中乙醇的定性及定量分析。

本标准的方法检出限为0.01mg/mL；定量下限为0.05mg/mL。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682  分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD）

GA/T 122 毒物分析名词术语

3 原理

本法利用乙醇的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测，经与平

行操作的乙醇对照品比较，以保留时间或相对保留时间定性，用内标法、峰面积比进行定量分析。

4 试剂和材料

除另有说明外，水为GB/T 6682规定的二级水。

4.1 乙醇

色谱纯。

4.2 乙醇标准溶液

精密称取适量乙醇，用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效

期为6个月。试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得，在冰箱中冷藏密闭保存，有效

期为3个月。

4.3 叔丁醇

色谱纯。

4.4 叔丁醇溶液

精密称取适量叔丁醇，用水配成5.0mg/mL叔丁醇储备液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期

为12个月。将储备液用水稀释，得40.0μg/mL叔丁醇内标工作液，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6

个月。

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5 仪器  

5.1 气相色谱仪

配火焰离子化检测器(FID)。

5.2 顶空进样器

配1mL定量进样环。

5.3 样品瓶

10mL，顶空自动进样器用。

5.4 硅橡胶垫。

5.5 铝帽。

5.6 密封钳。

5.7 精密移液器。

5.8 自动稀释仪。

6 测定步骤

6.1 样品处理

用精密移液器或自动稀释仪取样品血0.10 mL及0.50 mL 40.0μg/mL 叔丁醇内标工作液，加入样品瓶

内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。

6.2 测定

6.2.1 顶空气相色谱测定参考条件

a）色谱柱（1）：DB-ALC1（30m×0.32mm×1.8μm）石英毛细管柱或相当者；

柱温：恒温40°C；  

色谱柱（2）：DB-ALC2（30m×0.32mm×1.2μm）石英毛细管柱或相当者；

柱温：恒温40°C；

b）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速8mL/min；

c）进样口温度：150°C；

d）检测器温度：250°C；

e）加热箱温度：65℃；

f）定量环温度：105℃；

g）传输线温度：110℃；

h）气相循环时间：3.5min；

i）样品瓶加热平衡时间：10.0min；

j）样品瓶加压时间：0.10min；

k）定量环充满时间：0.10min；

l）定量环平衡时间：0.05min；

m）进样时间：1.00min。

6.2.2 定性测定

样品溶液按照顶空气相色谱测定条件测定，以叔丁醇为内标，计算色谱峰的相对保留时间，将样品

色谱峰的保留时间（或相对保留时间）与乙醇标准对照品的保留时间（或相对保留时间）比较，相对误

差小于2%，空白对照样品内标物色谱峰正常而无乙醇的色谱峰，可以认为检材中含有乙醇。如果内标物

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色谱峰正常，而无乙醇的色谱峰时，可认为检验结果为阴性。乙醇对照品和内标气相色谱图，参见附录

A。

6.2.3 定量测定

本方法采用内标法－校准曲线法或内标法－单点校正法定量测定。

6.2.3.1 内标法－校准曲线法

采用内标-校准曲线法测定（见附录B）。将乙醇对照品溶液进样，以乙醇和内标峰面积比为纵坐标，

乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，用标准曲线对样品进行定量，所测样品中乙醇的浓度

值应在线性范围内。

6.2.3.2 内标法－单点校正法

血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量。

6.3 平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验。

单柱单检测器两份样品测定结果按两份样品的平均值计算，双样相对相差不得超过5％（有凝血块

的血样不超过10％）。双样相对相差按式（1）计算：

                                    | C1 - C2|

双样相对相差（%） = ⎯⎯⎯⎯⎯ × 100  ………………………………(1)

                                      ⎯C

式中：

C1、C2⎯⎯两份样品平行定量测定的结果；

⎯C ⎯⎯两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+C2)/2。

双柱双检测器两份样品测定结果的相对标准偏差RSD（%）若不超过10％时（有凝血块的血样不超

过15％），结果按两份样品结果的平均值计算。

7 结果计算

血液中乙醇浓度测定采用内标法－校准曲线法定量或按式(2)计算：

                         A× Ai′×

c

                   C = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯                …………………………………(2)

                          A′×Ai              

式中：

C⎯⎯血液样品中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；

A⎯⎯血液样品中乙醇的峰面积；

A′⎯⎯标准溶液中乙醇的峰面积；

Ai′⎯⎯标准溶液中内标物的峰面积；

Ai⎯⎯血液样品中内标物的峰面积；

c

⎯⎯标准溶液中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)。

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附 录 A

（资料性附录）

乙醇对照品和内标气相色谱图

A.1 按色谱柱（1）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图A.1。

min0.511.522.5

pA

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 FID1 A,  (2009\09040304.D)

叔丁醇(2.09)

图A.1 按色谱柱（1）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图

A.2 按色谱柱（2）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图A.2。

min0.511.522.5

pA

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 FID2 B,  (2009\09040304.D)

图A.2 按色谱柱（2）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图

叔丁醇(2.03)

乙醇 (1.51)

乙醇 (1.43)