目  录

前  言...................................................................................II

1 主题内容与适用范围....................................................................1

2 规范性引用文件........................................................................1

3 原理..................................................................................1

4 仪器与试剂............................................................................1

5 操作方法..............................................................................1

6 结果评价................................................................................2

附 录(资料性附录).........................................................................3

F/Z JD0107010-2011

 II

前  言

本技术规范的附录为资料性附录。  

本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。

本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所负责起草。

本技术规范主要起草人：卓先义、刘伟、卜俊、向平、沈保华、马栋、严慧。  

SF/Z JD0107010-2011

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血液中碳氧血红蛋白饱和度的测定

分光光度法

1 主题内容与适用范围

    本技术规范规定了血液中碳氧血红蛋白饱和度（HbCO%）的测定方法。

    本技术规范适用于血液中HbCO%的定量分析。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本技术规范的引用而成为本技术规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随

后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本技术规范，然而，鼓励根据本技术规范达

成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本技

术规范。  

GA/T 122    毒物分析名词术语

GB/T 6682    分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

    分光光度法测定血液中HbCO%是基于在一定波长下，HbCO%与其吸光度成正比。利用双波长法，

从正常人血和CO饱和血的体系中选择两对等吸收点（本方法中选择λ1=530nm，λ2=583nm，λ3=569nm，

组成两对等吸收点，以有效消除干扰，减少误差），测出检材血及检材通入CO饱和血的两对等吸收点

的吸收度差值，以其比值求得HbCO%。

4 仪器与试剂

4.1  仪器：紫外/可见分光光度计。

4.2  移液器。

4.3  7mmol/L氢氧化铵稀释液：取0.05mL的28% NH3•H2O加蒸馏水稀释至100mL。

4.4  CO气体：管道煤气。

5 操作方法

5.1  样品测定

    用移液管吸取100μL血液检材置10mL试管中，用7mmol/L氢氧化胺稀释液10mL稀释，以稀释

液为参比，测其在λ1=530nm，λ2=583nm，λ3=569nm的吸收值A，求出ΔA1(Aλ1- Aλ2)、ΔA2 (Aλ3- Aλ2)，

然后将此样品溶液通CO气体约15分钟至饱和，气泡以1~2个/秒为宜，复测样品溶液在λ1=530nm，

λ2=583nm，λ3=569nm的吸收值 A'，求出ΔA1' (Aλ1'-Aλ2')、ΔA2' (Aλ3'-Aλ2')，根据ΔA1/ΔA1'和ΔA2/ΔA2'，

求出HbCO饱和度。

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5.2  记录与计算

记录检材在λ530nm、λ583nm、λ569nm的吸收值，求出ΔA1、ΔA2，样品溶液通CO气体后再测λ530nm、

λ583nm、λ569nm的吸收值，求出ΔA1'、ΔA2'， 血液中HbCO饱和度C按公式（1）计算：

C（%）=（C1'+ C2'）/ 2×100  ……………………………… (1)

式中：

C1'= ΔA1/ΔA1'

C2 '= ΔA2/ΔA2'

5.3  双样相对相差

样品应按以上步骤同时平行测定两份，双样相对相差按公式(2)计算：

12100

CC

C

−=×双样相对相差(%) ……………………………… (2)

式中：

C

1、

C

2 为两份检材平行定量测定的结果；

C

为两份检材平行定量测定结果的平均值（

C

1+

C

2）/ 2。

6 结果评价

6.1  正常吸烟者血液中HbCO%低于10%。一氧化碳中毒者血液中HbCO%应大于15%。

6.2  两份检材的双样相对相差不得超过20%，结果按两份检材HbCO%的平均值计算，否则需要重新

测定。